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血液分析仪及其临床应用

2020-08-11 175
功能特点:1.多参数分析;2.精确度高;3.操作简易速度快;4.标本用血量少;5.自动打印结果;6.具备质量控制功能;7.设置清洗功能;8.报警功能;9.筛选功能

一、检测原理

(一)细胞计数及体积测定原理

1. 阻抗型:血细胞通过→电阻变化→电脉冲信号

Coulter原理:血细胞是相对不良导体,当其悬浮于电解质溶液中通过检测微孔时,会改变微孔内外原来的恒定电阻,产生电脉冲。脉冲的大小:细胞体积;脉冲的数量:细胞数量

1.原理及组成

(1)检测原理:

基本结构:讯号发生器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统、自动控制保保护系统和电源。

血细胞直方图: 血液分析仪在测定红细胞、白细胞和血小板的多种数据的同时,把它们体积的大小(横轴)、出现的相对频率(纵轴)以坐标曲线图表示出来,形成血细胞体积分布直方图。

2.流式细胞术加光学检测原理:单个细胞通过检测区;前向散射光

(二)白细胞分类原理 1.电阻抗法白细胞直方图:两个明显分离的峰:左峰:小细胞群(淋巴细胞:35-90fl),两峰之间:中间细胞群(中间细胞:90-160fl)的分布。右峰:大细胞群(粒细胞:160-450fl)

2 容量、电导、光散射白细胞分类法(VCS)

体积(volume):电阻抗原理;

电导性(conductivity):采用高频电磁探针测量细胞内部结构—细胞核、细胞质的比例、细胞内的化学成份;

光散射(scantter):特别具有对细胞颗粒的构造和颗粒质量的区别能力,细胞粗颗粒的光散射要比细颗粒强。

3 阻抗与射频法

通过四个不同检测系统完成:

(1)嗜酸性粒细胞检测系统:特殊的pH的溶血剂溶解或萎缩除嗜酸性粒细胞以外的所有细胞。

(2)嗜碱性粒细胞检测系统:

(3)淋巴、单核、粒细胞的检测系统:

采用电阻抗与射频联合检测的方式。

电阻抗(DC) :细胞大小

射频(RF):核的大小及颗粒的多少。

两个不同的脉冲信号,以DC信号为横坐标,RF为纵坐标,把同一个细胞定位于二维的细胞散射图上。

(4)幼稚细胞检测系统:

原理:幼稚细胞膜上脂质较少。加入硫化氨基酸后,结合在幼稚细胞的硫化氨基酸较成熟细胞多,且对溶血剂有抵抗作用。当加入溶血剂后,成熟细胞被溶解,幼稚细胞不受破坏。

4.激光与细胞化学法(SCC)

1)过氧化物酶检测通道

Eos--很强的过氧化物酶活性;Neu--较强的过氧化物酶活性;Mon--较弱的过氧化物酶活性;Lym,Bas--无此酶

由于酶反应强度不同,以X轴为吸光率标记(酶反应强度),Y轴为光散射(细胞大小)。每个细胞产生的两个信号结合定位在细胞图上。

2)嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道

5. 多角度偏振光散射法术

四个角度测定散射光的密度:

①0°:前角光散射粗略地测定细胞大小;

②10°:狭角光散射测细胞结构及其复杂性;

③90°:垂直光散射主要对细胞内部颗粒和细胞成份进行测量;

④90°:90°消偏振光散射(70°~110°)

从这四个角度同时对每个白细胞进行测量,将白细胞分为嗜酸粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。

(三)红细胞测定原理

1.RBC.Hct:电阻抗法

2.Hb:比色法:HiCN SLS-Hb

3.MCV,MCH,MCHC,RDW:推算

(四)Plt测定原理

血小板体积分布直方图 2-20fl之间。21-30fl之间有少量大血小板,一般仪器以30fl为最大的分析界标。

(五)网织红细胞计数原理

(六)工作流程

以国内使用较多一种为例:该仪器配有二个小孔管,三个测试系统。

二 、血液分析仪的类型

全自动和半自动分析仪的区别: --血液在机外是否需要预稀释

半自动分析仪:需事先稀释;全自动分析仪:机内自动稀释

四、临床应用

(一)检测参数临床意义

1.红细胞参数

(1)MCV和RDW

红细胞体积分布宽度临床意义(red cell volume distribution width RDW)

RDW为反映红细胞体积异质性的参数,表示方法为红细胞体积大小的变异系数(CV%)。增大时有临床意义。

1)鉴别缺铁性贫血和B-珠蛋白合成障碍性贫血:

MCV RDW

缺铁性贫血 ↓  ↑

B-珠蛋白合成障碍性贫血 ↓ _

2)用于缺铁性贫血的诊断与疗效观察:

缺铁性贫血RDW增大;铁剂治疗有效时,RDW比给药前更大,以后逐渐降至正常水平。

原因:补铁后产生网织红细胞,及正常红细胞生成并释放入血与给药前的小红细胞并存,故RDW先增大,随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少,RDW便逐渐降至参考范围

3)用于贫血的分类:

MCV只能反映红细胞平均体积的大小,不能代表红细胞体积大小的异质性;RDW能较好地反映红细胞体积的异质性;MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善。

2 血小板参数

MPV的临床意义(结合PLT变化)

1)PLT与MPV

①骨髓造血功能损伤,MPV减少;②血小板破坏增多,MPV增大;③血小板分布异常,MPV正常。

2)MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征:

骨髓造血功能衰竭时,MPV与PLT同时持续下降;造血功能抑制越严重,MPV越小;当造血功能恢复时,MPV增大常先于PLT升高。

3)其他方面应用:

①MPV增大:见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫瘢(ITP)、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。

②MPV减小:见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。

(二)红细胞直方图在贫血中应用

可鉴别贫血类型

1.小细胞性贫血

轻型β—血红蛋白合成障碍;缺铁性贫血;铁粒幼细胞性贫血

轻型β—血红蛋白合成障碍(轻型β—珠蛋白生成障碍性贫血):峰左移,峰底变窄,典型的小细胞均一性贫血。

缺铁性贫血治疗前:波峰左移,峰底变宽,显示小细胞不均一性。

缺铁性贫血治疗后:双峰形

铁粒幼细胞性贫血:呈典型的“双峰形”性改变。在缺铁性贫血经治疗有效时,也可出现类似的图形,但峰底要更宽些。

叶酸缺乏引起的巨幼细胞性贫血治疗前--波峰右移,峰底增宽,显示明显的大细胞不均一性

叶酸缺乏引起的巨幼细胞性贫血治疗后--双峰形。

(三)血小板直方图的临床应用

2-20fl之间。21-30fl之间有少量大血小板,一般仪器以30fl为最大的分析界标。

血小板体积增大:明显的拖尾现象。小红细胞或红细胞碎片干扰:尾部抬高。

(四)白细胞直方图的临床应用

估计血液群体的变化,但无特异性

末梢血淋巴细胞增多,急淋,急非淋白血病:中间细胞明显增高,直方图上只见一个峰,无法分辨,必须推片染色检查.

反映某些人为或病理变化干扰,如有核RBC或大血小板出现。

白血病

中性粒细胞减少症


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